L’Ordre est composé d’une classe unique de Chevaliers qui portent le collier en or, le ruban de soie moirée rouge et la plaque. Il a un caractère noble et n’est décerné qu’à certains souverains ou chefs des grandes familles nobles de l’ancien Royaume ou d’Europe. Exceptionnellement, les Cardinaux de la Sainte Église Romaine reçoivent également l’insigne de l’ordre de Saint-Janvier.

« Le nombre ordinaire des Chevaliers s’élèvera à soixante », comme l’énonce le Chapitre IV des Statuts promulgués le 3 juillet 1738 par le Roi Charles de Bourbon et rétablis par Décret Magistral du 15 mai 2002 par S.A.R. le Prince Ferdinand, Duc de Castro, de vénérée mémoire. Les Princes de la Maison Royale des Deux-Siciles sont considérés comme des chevaliers surnuméraires.

Les Statuts de l’Ordre stipulent en outre qu’il s’agit d’une institution catholique vouée à promouvoir la véritable chevalerie et la fraternité chrétienne. Le devoir principal des Chevaliers est « l’accroissement, à tout prix, de la très sainte Religion » et d’« agir vertueusement » pour être un « exemple héroïque de piété envers Dieu et de fidélité envers leur Prince » (cf. première partie des Statuts de l’I.R.O. de Saint-Janvier 1738).